高中生物實驗知識點整合,高中生物實驗知識點總結

時間:2022-04-29 01:03:04 總結 我要投稿
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高中生物實驗知識點整合,高中生物實驗知識點總結

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高中生物實驗知識點整合,高中生物實驗知識點總結

高中生物實驗知識點整合,高中生物實驗知識點總結1

  高中生物實驗知識點總結

  一、光學顯微鏡的結構、呈像原理、放大倍數計算方法

  結構:

  光學部分:目鏡、鏡筒、物鏡、遮光器(有大小光圈)和反光鏡(有平面鏡和凹面鏡)機械部分:鏡座、傾斜關節、鏡臂、載物臺(上有通光孔、壓片夾)、鏡頭轉換器、粗、細準焦螺旋。

  注:目鏡無旋轉螺絲,鏡頭越長,放大倍數越小;物鏡有旋轉螺絲,鏡頭越長,放大倍數越大。

  呈像原理:映入眼球內的是倒立放大的虛像。(物鏡質量的優劣直接影響成像的清晰程度)放大倍數:目鏡和物鏡二者放大倍數的乘積)

  注:顯微鏡放大倍數是指直徑倍數,即長度和寬度,而不是面積。

  二、顯微鏡的使用:置鏡(裝鏡頭)→對光→置片→調焦→觀察

  1.安放。顯微鏡放置在桌前略偏左,距桌緣8―10cm處,裝好物鏡和目鏡(目鏡5×物鏡10×)

  2.對光。轉動轉換器,使低倍鏡對準通光孔,選取較大光圈對準通光孔。左眼注視目鏡,同時把反光鏡轉向光源,直至視野光亮均勻適度。調節視野亮度只可用遮光器和反光鏡,光線過強,改用較小光圈或用平面反光鏡;光線過弱,改用較大光圈或用凹面反光鏡。選低倍鏡→選較大的光圈→選反光鏡(左眼觀察)

  3.觀察。將切片或裝片放在載物臺上,標本正對通光孔中心。轉動粗準焦螺旋(順時針),俯首側視鏡筒慢慢下降,直到物鏡接近切片(約0.5cm),左眼觀察目鏡,(反時針)旋轉粗準焦螺旋,使鏡筒慢慢上升,看到物像時輕微來回旋轉細準焦,直到物像清晰。(找不到物像時,可重復一次或移動裝片使標本移至通光孔中心)。.觀察時兩眼都要睜開,便于左眼觀察,右眼看著畫圖。側面觀察降鏡筒→左眼觀察找物像→細準焦螺旋調清晰

  4.高倍鏡的轉換。找到物像后,把要觀察的物像移到視野中央,把低倍鏡移走,換上高倍鏡,只準用細準焦螺旋和反光鏡把視野調整清晰,直到物像清楚為止。

  順序:移裝片→轉動鏡頭轉換器→調反光鏡或光圈→調細準焦螺旋

  注:換高倍物鏡時只能移動轉換器,換鏡后,只準調節細準焦和反光鏡(或光圈)。問1:低倍鏡換為高倍鏡后,若看不到或看不清原來的像,可能原因?(ABC)

  A、物像不在視野中B、焦距不在同一平面C、載玻片放反,蓋玻片在下面D、未換目鏡問2:放大倍數與視野的關系:

  放大倍數越小,視野范圍越大,看到的細胞數目越多,視野越亮,工作距離越長;放大倍數越大,視野范圍越小,看到的細胞數目越少,視野越暗,工作距離越短。故裝片不能反放。

  5.裝片的制作和移動:制作:滴清水→放材料→蓋片

  移動:物像在何方,就將載玻片向何處移。(原因:物像移動的方向和實際移動玻片的方向相反)

  6.污點判斷:1)污點隨載玻片的移動而移動,則位于載玻片上;

  2)污點不隨載玻片移動,換目鏡后消失,則位于目鏡;換物鏡后消失,則位于物鏡;

  3)污點不隨載玻片移動,換鏡后也不消失,則位于反光鏡上。

  7.完畢工作。使用完畢后,取下裝片,轉動鏡頭轉換器,逆時針旋出物鏡,旋進鏡頭盒;取出目鏡,插進鏡頭盒,蓋上。把顯微鏡放正。

  實驗一:觀察DNA、RNA在細胞中的分布(必修一P26)

  一.實驗目的:初步掌握觀察DNA和RNA在細胞中分布的方法

  二.實驗原理:

  1.甲基綠和吡羅紅兩種染色劑對DNA和RNA的親和力不同,甲基綠使DNA呈現綠色,吡羅紅使RNA呈現紅色。利用甲基綠、吡羅紅混合染色劑將細胞染色,可以顯示DNA和RNA在細胞中的分布。

  2.鹽酸能夠改變細胞膜的通透性,加速染色劑進入細胞,同時使染色休中的DNA和蛋白質分離,有利于DNA與染色劑結合。

  三.方法步驟:

  操作步驟注意問題解釋

  取口腔上皮細胞制片載玻片要潔凈,滴一滴質量分數為0.9%的NaCl溶液

  用消毒牙簽在自己漱凈的口腔內側壁上輕刮幾下取細胞

  將載玻片在酒精燈下烘干防止污跡干擾觀察效果

  保持細胞原有形態

  消毒為防止感染,漱口避免取材失敗

  固定裝片

  水解將烘干的載玻片放入質量分數為8%的鹽酸溶液中,用300C水浴保溫5min改變細胞膜的通透性,加速染色劑進入細胞,促進染色體的DNA與蛋白質分離而被染色沖冼涂片用蒸餾水的緩水流沖洗載玻片10S洗去殘留在外的鹽酸

  染色滴2滴吡羅紅甲綠染色劑于載玻片上染色5min

  觀察先低倍鏡觀察,選擇染色均勻、色澤淺的區域,移至視野中央,調節清晰后才換用高倍物鏡觀察使觀察效果最佳

  實驗二檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(必修一P18)

  一.實驗目的:嘗試用化學試劑檢測生物組織中糖類、脂肪和蛋白質

  二.實驗原理:某些化學試劑能使生物組織中的有關有機化合物,產生特定的顏色反應。

  1.可溶性還原糖(如葡萄糖、果糖、麥芽糖)與斐林試劑發生作用,可生成磚紅色的Cu2O沉淀。如:

  葡萄糖+Cu(OH)2葡萄糖酸+Cu2O↓(磚紅色)+H2O,即Cu(OH)2被還原成Cu2O,葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。

  2.脂肪可以被蘇丹Ⅲ染液染成橘黃色(或被蘇丹Ⅳ染液染成紅色)。淀粉遇碘變藍色。

  3.蛋白質與雙縮脲試劑發生作用,產生紫色反應。(蛋白質分子中含有很多肽鍵,在堿性NaOH溶液中能與雙縮脲試劑中的Cu2+作用,產生紫色反應。)

  三.實驗材料

  1.做可溶性還原性糖鑒定實驗,應選含糖高,顏色為白色的植物組織,如蘋果、梨。(因為組織的顏色較淺,易于觀察。)

  2.做脂肪的鑒定實驗。應選富含脂肪的種子,以花生種子為最好,實驗前一般要浸泡3~4小時(也可用蓖麻種子)。

  3.做蛋白質的鑒定實驗,可用富含蛋白質的黃豆或雞蛋清。

  四、實驗試劑

  斐林試劑(包括甲液:質量濃度為0.1g/mLNaOH溶液和乙液:質量濃度為0.05g/mLCuSO4溶液)、蘇丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ染液、雙縮脲試劑(包括A液:質量濃度為0.1g/mLNaOH溶液和B液:質量濃度為0.01g/mLCuSO4溶液)、體積分數為50%的酒精溶液,碘液、蒸餾水。

  五、方法步驟:

  (一)可溶性糖的鑒定

  操作方法注意問題解釋

  1.制備組織樣液。

  (去皮、切塊、研磨、過濾)蘋果或梨組織液必須臨時制備。因蘋果多酚氧化酶含量高,組織液很易被氧化成褐色,將產生的顏色掩蓋。

  2.取1支試管,向試管內注入2mL組織樣液。

  3.向試管內注入1mL新制的斐林試劑,振蕩。應將組成斐林試劑的甲液、乙液分別配制、儲存,使用前才將甲、乙液等量混勻成斐林試劑;

  切勿將甲液、乙液分別加入蘋果組織樣液中進行檢測。斐林試劑很不穩定,甲、乙液混合保存時,生成的Cu(OH)2在70~900C下分解成黑色CuO和水;

  甲、乙液分別加入時可能會與組織樣液發生反應,無Cu(OH)2生成。

  4.試管放在盛有50-650C溫水的大燒杯中,加熱約2分鐘,觀察到溶液顏色:淺藍色→棕色→磚紅色(沉淀)最好用試管夾夾住試管上部,使試管底部不觸及燒杯底部,試管口不朝向實驗者。

  也可用酒精燈對試管直接加熱。防止試管內的溶液沖出試管,造成燙傷;

  縮短實驗時間。

  (二)脂肪的鑒定

  操作方法注意問題解釋

  花生種子浸泡、去皮、切下一些子葉薄片,將薄片放在載玻片的水滴中,用吸水紙吸去裝片中的水。干種子要浸泡3~4小時,新花生的浸泡時間可縮短。因為浸泡時間短,不易切片,浸泡時間過長,組織較軟,切下的薄片不易成形。切片要盡可能薄些,便于觀察。在子葉薄片上滴2~3滴蘇丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ染液,染色1分鐘。染色時間不宜過長。用吸水紙吸去薄片周圍染液,用50%酒精洗去浮色,吸去酒精。酒精用于洗去浮色,不洗去浮色,會影響對橘黃色脂肪滴的觀察。同時,酒精是脂溶性溶劑,可將花生細胞中的脂肪顆粒溶解成油滴。

  用吸水紙吸去薄片周圍酒精,滴上1~2滴蒸餾水,蓋上蓋玻片。滴上清水可防止蓋蓋玻片時產生氣泡。

  低倍鏡下找到花生子葉薄片的最薄處,可看到細胞中有染成橘黃色或紅色圓形小顆粒。裝片不宜久放。時間一長,油滴會溶解在乙醇中。

  實驗一觀察DNA和RNA在細胞中的分布

  實驗原理:DNA綠色,RNA紅色

  分布:真核生物DNA主要分布在細胞核中,線粒體和葉綠體內也含有少量的DNA;RNA主要分布在細胞質中。

  實驗結果:細胞核呈綠色,細胞質呈紅色.

  實驗二物質鑒定

  還原糖+斐林試劑~磚紅色沉淀

  脂肪+蘇丹III~橘黃色

  脂肪+蘇丹IV~紅色

  蛋白質+雙縮脲試劑~紫色反應

  1、還原糖的檢測

  (1)材料的選取:還原糖含量高,白色或近于白色,如蘋果,梨,白蘿卜。

  (2)試劑:斐林試劑(甲液:0.1g/mL的NaOH溶液,乙液:0.05g/mL的`CuSO4溶液),現配現用。

  (3)步驟:取樣液2mL于試管中→加入剛配的斐林試劑1mL(斐林試劑甲液和乙液等量混合均勻后再加入)→水浴加熱2min左右→觀察顏色變化(白色→淺藍色→磚紅色)★模擬尿糖的檢測

  1、取樣:正常人的尿液和糖尿病患者的尿液

  2、檢測方法:斐林試劑(水浴加熱)或班氏試劑或尿糖試紙

  3、結果:(用斐林試劑檢測)試管內發生出現磚紅色沉淀的是糖尿病患者的尿液,未出現磚紅色沉淀的是正常人的尿液。

  4、分析:因為糖尿病患者的尿液中含有還原糖,與斐林試劑發生反應產生磚紅色沉淀,而正常人尿液中無還原糖,所以沒有發生反應。

  2、脂肪的檢測

  (1)材料的選取:含脂肪量越高的組織越好,如花生的子葉。

  (2)步驟:制作切片(切片越薄越好)將最薄的花生切片放在載玻片中央

  ↓

  染色(滴蘇丹Ⅲ染液2~3滴切片上→2~3min后吸去染液→滴體積分數50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精)

  ↓

  制作裝片(滴1~2滴清水于材料切片上→蓋上蓋玻片)

  ↓

  鏡檢鑒定(顯微鏡對光→低倍鏡觀察→高倍鏡觀察染成橘黃色的脂肪顆粒)

  3、蛋白質的檢測

  (1)試劑:雙縮脲試劑(A液:0.1g/mL的NaOH溶液,B液:0.01g/mL的CuSO4溶液)

  (2)步驟:試管中加樣液2mL→加雙縮脲試劑A液1mL,搖勻→加雙縮尿試劑B液4滴,搖勻→觀察顏色變化(紫色)

  考點提示:

  (1)常見還原性糖與非還原性糖有哪些?

  葡萄糖、果糖、麥芽糖都是還原性糖;淀粉、蔗糖、纖維素都是非還原性糖。

  (2)還原性糖植物組織取材條件?

  含糖量較高、顏色為白色或近于白色,如:蘋果、梨、白色甘藍葉、白蘿卜等。

  (3)研磨中為何要加石英砂?不加石英砂對實驗有何影響?

  加石英砂是為了使研磨更充分。不加石英砂會使組織樣液中還原性糖減少,使鑒定時溶液顏色變化不明顯。

  (4)斐林試劑甲、乙兩液的使用方法?混合的目的?為何要現混現用?

  混合后使用;產生氫氧化銅;氫氧化銅不穩定。

  (5)還原性糖中加入斐林試劑后,溶液顏色變化的順序為:淺藍色棕色磚紅色

  (6)花生種子切片為何要薄?只有很薄的切片,才能透光,而用于顯微鏡的觀察。

  (7)轉動細準焦螺旋時,若花生切片的細胞總有一部分清晰,另一部分模糊,其原因一般是什么?

  切片的厚薄不均勻。

  (8)脂肪鑒定中乙醇作用?洗去浮色。

  (9)雙縮脲試劑A、B兩液是否混合后用?先加A液的目的。怎樣通過對比看顏色變化?不能混合;先加A液的目的是使溶液呈堿性;先留出一些大豆組織樣液做對比。

  實驗三觀察葉綠體和細胞質流動

  1、材料:新鮮蘚類葉、黑藻葉或菠菜葉,口腔上皮細胞臨時裝片

  2、原理:葉綠體在顯微鏡下觀察,綠色,球形或橢球形。

  用健那綠染液染色后的口腔上皮細胞中線粒體成藍綠色,細胞質接近無色。

  知識概要:

  取材制片低倍觀察高倍觀察

  考點提示:

  (1)為什么可直接取用蘚類的小葉,而不能直接取用菠菜葉?

  因為蘚類的小葉很薄,只有一層細胞組成,而菠菜葉由很多層細胞構成。

  (2)取用菠菜葉的下表皮時,為何要稍帶些葉肉?

  表皮細胞除保衛細胞外,一般不含葉綠體,而葉肉細胞含較多的葉綠體。

  (3)怎樣加快黑藻細胞質的流動速度?最適溫度是多少?

  進行光照、提高水溫、切傷部分葉片;25℃左右。

  (4)對黑藻什么部位的細胞觀察,所觀察到的細胞質流動的現象最明顯?

  葉脈附近的細胞。

  (5)若視野中某細胞中細胞質的流動方向為順時針,則在裝片中該細胞的細胞質的實際流動方向是怎樣的?

  仍為順時針。

  (6)是否一般細胞的細胞質不流動,只有黑藻等少數植物的細胞質才流動?

  否,活細胞的細胞質都是流動的。

  (7)若觀察植物根毛細胞細胞質的流動,則對顯微鏡的視野亮度應如何調節?視野應適當調暗一些,可用反光鏡的平面鏡來采光或縮小光圈。

  (8)在強光照射下,葉綠體的向光面有何變化?葉綠體的受光面積較小有一面面向光源。

  實驗四觀察有絲分裂

  1、材料:洋蔥根尖(蔥,蒜)

  2、步驟:(一)洋蔥根尖的培養

  (二)裝片的制作

  制作流程:解離→漂洗→

  知識點高中

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  高中生物實驗知識點總結

  實驗一觀察DNA和RNA在細胞中的分布

  實驗原理:DNA綠色(甲基綠),RNA紅色(吡羅紅)

  分布:真核生物DNA主要分布在細胞核中,線粒體和葉綠體內也含有少量的DNA;RNA主要分布在細胞質中。

  實驗結果:細胞核呈綠色,細胞質呈紅色.(高倍顯微鏡下看不到DNA、RNA分子)實驗二物質鑒定

  還原糖+斐林試劑(水浴加熱)~磚紅色沉淀

  脂肪+蘇丹III~橘黃色

  脂肪+蘇丹IV~紅色

  蛋白質+雙縮脲試劑~紫色反應

  斐林試劑現配現用,甲液和乙液等量混合均勻后再加入。

  雙縮脲試劑A液、B液分開加。

  葡萄糖、果糖、麥芽糖都是還原性糖;淀粉、蔗糖、纖維素都是非還原性糖。實驗三觀察葉綠體和細胞質流動

  1、材料:新鮮蘚類葉、黑藻葉或菠菜葉,口腔上皮細胞臨時裝片

  2、原理:葉綠體在顯微鏡下觀察,綠色,球形或橢球形。

  用健那綠染液染色后的口腔上皮細胞中線粒體成藍綠色,細胞質接近無色。知識概要:

  (1)為什么可直接取用蘚類的小葉,而不能直接取用菠菜葉?

  因為蘚類的小葉很薄,只有一層細胞組成,而菠菜葉由很多層細胞構成。

  (2)取用菠菜葉的下表皮時,為何要稍帶些葉肉?

  表皮細胞除保衛細胞外,一般不含葉綠體,而葉肉細胞含較多的葉綠體。

  (3)怎樣加快黑藻細胞質的流動速度?最適溫度是多少?

  進行光照、提高水溫、切傷部分葉片;25℃左右。

  (4)對黑藻什么部位的細胞觀察,所觀察到的細胞質流動的現象最明顯?

  葉脈附近的細胞。

  (5)若視野中某細胞中細胞質的流動方向為順時針,則在裝片中該細胞的細胞質的實際流動方向是怎樣的?

  仍為順時針。

  (6)是否一般細胞的細胞質不流動,只有黑藻等少數植物的細胞質才流動?否,活細胞的細胞質都是流動的。

  實驗四觀察有絲分裂

  制作流程:解離→漂洗→染色→制片

  1.解離:藥液:質量分數為15%的鹽酸,體積分數為95%的酒精(1:1混合液).時間:3~5min.目的:使組織中的細胞相互分離開來.

  2.漂洗:用清水漂洗約10min.目的:洗去藥液,防止解離過度,并有利于染色.

  3.染色:用質量濃度為0.01g/mL或0.02g/mL的龍膽紫溶液(或醋酸洋紅液)染色3~5min目的:使染色體著色,利于觀察.

  4.制片:將根尖放在載玻片上,加一滴清水,并用鑷子把根尖弄碎,蓋上蓋玻片,在蓋玻片上再加一片載玻片.然后用拇指輕輕地按壓載玻片.目的:使細胞分散開來,有利于觀察.

  (三)觀察

  1、先在低倍鏡下找到根尖分生區細胞:細胞呈正方形,排列緊密,有的細胞正在分裂。

  2、換高倍鏡下觀察:分裂中期→分裂前、后、末期→分裂間期。(注意各時期細胞內染色體形態和分布的特點)。其中,處于分裂間期的細胞數目最多。

  實驗五色素的提取和分離

  1、原理:葉綠體中的`色素能溶解在有機溶劑丙酮或無水乙醇――提取色素

  各色素在層析液中的溶解度不同,隨層析液在濾紙上擴散速度不同――分離色素

  2、步驟:

  (1)提取色素研磨

  (2)制備濾紙條

  (3)畫濾液細線:均勻,直,細,重復若干次

  (4)分離色素:不能讓濾液細線觸及層析液

  (5)觀察和記錄:結果濾紙條上從上到下依次為:橙黃色(胡蘿卜素)、黃色(葉黃素)、藍綠色(葉綠素a)、黃綠色(葉綠素b).

  二氧化硅(為了使研磨充分),

  碳酸鈣(保護色素,防止在研磨時葉綠體中的色素受到破壞)

  實驗六觀察質壁分離和復原

  結論:細胞外溶液濃度>細胞內溶液濃度,細胞失水質壁分離

  細胞外溶液濃度<細胞內溶液濃度,細胞吸水質壁分離復原

  實驗七探究酵母菌的呼吸方式

  1、原理:酵母菌在有氧條件下進行有氧呼吸,產生二氧化碳和水:

  C6H12O6+6O2+6H2O→6CO2+12H2O+能量

  在無氧條件下進行無氧呼吸,產生酒精和少量二氧化碳:

  C6H12O6→2C2H5OH+2CO2+少量能量

  2、檢測:(1)檢測CO2的產生:使澄清石灰水變渾濁,或使溴麝香草酚藍水溶液由藍變綠再變黃。

  (2)檢測酒精的產生:橙色的重鉻酸鉀溶液,在酸性條件下與酒精發生反應,變成灰綠色。實驗八低溫誘導染色體加倍

  1、原理:用低溫處理植物分生組織細胞,能夠抑制紡錘體的形成,以致影響染色體被拉向兩極,細胞也不能分裂成兩個子細胞,于是,植物細胞染色體數目發生變化。

  2、討論:秋水仙素與低溫都能誘導染色體數目加倍,這兩種方法在原理上有什么相似之處?都能抑制紡錘體的形成

  實驗九調查常見的人類遺傳病

  要求:調查的群體應足夠大;選取群體中發病率較高的單基因遺傳病。如紅綠色盲、白化病、高度近視(600度以上)等.

  實驗十探究植物生長調節劑對扦插枝條生根的作用

  1、常用的生長素類似物:NAA(萘乙酸),2,4-D,IPA(苯乙酸).IBA(吲哚丁酸)等

  2、方法:

  ①浸泡法:把插條的基部浸泡在配置好的溶液中,深約3cm,處理幾小時或一天。處理完畢就可以扦插了。這種處理方法要求溶液的濃度較低,并且最好是在遮蔭和空氣濕度較高的地方進行處理。

  ②沾蘸法:把插條的基部在濃度較高的藥液中蘸一下(約5s),深約1.5cm即可。

  3、預實驗:先設計一組濃度梯度較大的實驗進行探索,在此基礎上設計細致的實驗。實驗十一種群密度的取樣調查

  (1)什么是種群密度的取樣調查法?

  在被調查種群的生存環境內,隨機選取若干個樣方,以所有樣方種群密度的平均值作為該種群的種群密度。

  (2)為了便于調查工作的進行,在選擇調查對象時,一般應選單子葉植物,還是雙子葉植物?為什么?

  一般應選雙子葉植物,因為雙子葉植物的數量便于統計。

  (3)在樣方中統計植物數目時,若有植物正好長在邊線上,應如何統計?

  只計算該樣方相鄰的兩條邊上的植物的數目。

  (4)在某地域中,第一次捕獲某種動物M只,標志后放回原處。第二次捕獲N只,其中含標志個體Y只,求該地域中該種動物的總數。MN/Y

  (5)應用上述標志重捕法的條件有哪些?①標志個體在整個調查種群中均勻分布,標志個體和未標志個體都有同樣被捕的機會。②調查期中,沒有遷入或遷出。③沒有新的出生或死亡。

  植物:樣方法

  動物:標志重捕法

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